Lianna是Addgene的生物学主任,她于2001年毕业于以色列理工学院,获得生物学学士学位,并在伊利诺伊州埃文斯顿的西北大学继续攻读博士学位。在研究生期间,她研究了青蛙、酵母和(主要)苍蝇。她拥有广泛的分子生物学(PCR,克隆,测序等)知识和相当多的生物化学经验(细菌表达,蛋白质纯化和western blotting)。
基于拓扑异构酶的克隆(TOPO克隆)是一种不使用限制性内切酶或连接酶的DNA克隆方法,不需要pcr后程序。听起来很简单吧?该技术依赖于互补碱基对腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的基本能力。
恭喜你,你有一个表达你感兴趣的基因(YGOI)的质粒,并准备好进入你的功能实验!无论你是自己克隆了质粒,还是从楼下的同事那里获得的,花点时间来确认总是一个好主意……
载体(或空骨架)在分子生物学中经常用于分离、繁殖或表达它们在目标细胞中携带的插入物。这些载体允许你在不同条件下的受控环境中测试你的感兴趣基因(YGOI)的功能。…
本博客最初发表于BitesizeBio。作为我在Addgene公司确保质粒质量的工作的一部分,我每周分析50-100个测序反应。所以我养成了一些好习惯,我想传给你们,以确保你们能从数据中获得最多的信息。