计划AAV包装转染的PEI计算器

由贝丝学会主席

俗话说,“计划失败就是计划失败。”准备工作是任何实验的关键一步,可以帮助预防未来的头痛。来帮助你计划PEI转染用于AAV包装,考虑使用这裴计算器。AAV包装通常需要转染三个特定摩尔比的质粒。为了得到正确的比率,你需要做一些计算。这个计算器可以为你做数学,并且很容易调整组织培养皿的类型和使用的培养皿的数量。让AAV包装变得更简单!

点击这里下载PEI计算器的AAV包装

使用PEI转染计算器进行AAV包装

  1. 选择质粒的摩尔比,你想使用您的AAV包装转染。在我的实验室,我们经常使用以下比率:
    1. 1转移质粒:1 pHelper: 1 RepCap OR
    2. 3转移质粒:5 pHelper: 2 RepCap

  2. 选择你将在哪种组织培养皿中进行转染:
    1. 15厘米盘子或
    2. CF5栈

  3. 选择你计划转染的盘子或栈数:
    1. 1到10

  4. 在电子表格中填写实验细节:
    1. 命名你的病毒准备
    2. 输入您计划使用的质粒的具体名称
    3. 输入这些质粒的碱基对大小
    4. 输入质粒浓度

电子表格将计算如下

  1. 每盘或每堆需要每粒质粒μg。计算的基础是每15厘米培养皿使用28 μg总质粒(转移、辅助和RepCap加在一起)或每CF5堆栈使用2500 μg质粒。
  2. 整个实验所需每个质粒的总ug
  3. 整个实验所需质粒的总体积(μL)

这是计算器用来计算每个质粒所需的μl的公式。在计算器电子表格中,方程的每一部分都标有相应的列:

PEI AAV包装转染方程

我们希望这个计算器将使您更容易计划您的AAV包装实验。在下面的评论部分告诉我们你对这个计算器的看法。


参考文献

1.Choi, Vivian W,等。体外和体内使用的重组腺相关病毒载体的生产伟德BV下载分子生物学的当前协议第16 - 25(2007):。PubMedPMID: 18265393

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